食品和飼料中三聚氰胺檢測方法有哪些？
2.5高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析法(HPLC-MSMS)
液質(zhì)聯(lián)用法與高效液相色譜法一樣，也不需要進(jìn)行衍生化，與液相色譜法相比，具有高靈敏度和高選擇性的特點(diǎn)，適合于濃度相對(duì)較低的樣品中三聚氰胺的分析，質(zhì)譜或二級(jí)質(zhì)譜作為確證手段。此法需要對(duì)質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，使用較多的儀器是Agilent公司的HP1100高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀。常用的流動(dòng)相為含有醋酸銨的水或乙腈溶液和甲醇或乙腈，質(zhì)譜的檢測方式為多反應(yīng)選擇監(jiān)測(MRM)模式。該方法簡單快速、抗干擾能力強(qiáng)、檢出限低、重復(fù)性好、定性可靠、定量準(zhǔn)確，經(jīng)大量樣品實(shí)際檢測證明，該方法適合于生產(chǎn)過程的監(jiān)控和進(jìn)出口把關(guān)檢測的高靈敏度確證和定量分析。丁濤等利用HPLC-DAD進(jìn)行樣品中三聚氰胺的初篩，利用HPLC-MS-MS進(jìn)行確證。HPLCDAD的檢測低限為10mg/kg，HPLC-MS-MS的檢測低限為0.5mg/kg;HPLC-DAD的添加回收率為76%～88%，HPLC-MS-MS的添加回收率為72%～82%(基質(zhì)匹配曲線校正)，2種方法的添加回收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為3.4%～6.4%。張林田等針對(duì)不同食品采用不同的前處理__方法，采用C18、SCX陽離子(質(zhì)量比為4:1)混合填料質(zhì)譜柱分離，pH3.5的10mmol/L乙酸銨溶液與乙腈以體積比40:60混合的溶液為流動(dòng)相，串聯(lián)質(zhì)譜電噴霧離子源(ESI)正離子模式檢測，外標(biāo)法定量，測得三聚氰胺質(zhì)量濃度在50g/L以內(nèi)呈線性，測定下限為10g/kg。
2.6氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法與高效液相色譜法相比可降低假陽性率，提高準(zhǔn)確度，起確證、定量的作用。此法需要硅烷化衍生，雖然步驟較繁瑣費(fèi)時(shí)，但起到了有效地去除基質(zhì)干擾的作用，靈敏度高，方法穩(wěn)定。李東剛等建立了三重四極桿氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析乳粉中三聚氰酸和三聚氰胺的方法。樣品以甲醇提取，利用衍生化試劑BSTFATMCS(99:1，v/v)進(jìn)行衍生化處理，該方法在0.010～0.500mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，三聚氰酸和三聚氰胺的檢測限分別為0.016、0.003mg/kg，精密度為4.5%～8.6%、3.9%～6.2%，回收率分別為84.0%～102.0%、88.5%～104.0%。賀利民等建立了基于分子印跡固相萃取氣相色譜-質(zhì)譜測定雞蛋中三聚氰胺的確證方法，采用本體聚合法合成了對(duì)三聚氰胺具有良好交叉識(shí)別能力的分子印跡聚合物，將其制備成固相萃取小柱，可有效分離、凈化和富集雞蛋中的三聚氰胺，在25.0～500ng/mL濃度范圍內(nèi)，線性良好(r>0.99)，在50、500、1000g/kg添加水平，雞蛋中三聚氰胺的平均回收率分別為82.5%、84.5%及81.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%，以3倍信噪(S/N)比計(jì)算，方法檢出限(LOD)達(dá)10g/kg。邵德佳等將飼料用三氯乙酸和乙酸鉛溶液提取，再經(jīng)PCX固相萃取柱凈化、BSTFA衍生化，定容后用氣相色譜-質(zhì)譜測定，并以同位素內(nèi)標(biāo)定量。飼料中三聚氰胺的檢出限為50μg/kg，三聚氰胺的測定在125～5000ng/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，配合飼料、濃縮飼料、預(yù)混飼料中的平均回收率分別為95.0%、95.6%、94.9%。
2.7近紅外吸收檢測法
氰胺類化學(xué)物雖然含有與蛋白質(zhì)相同的氮元素，但由于分子結(jié)構(gòu)完全不同，因此其分子結(jié)構(gòu)的分子振動(dòng)信息也就不可能一致。三聚氰胺在指紋吸收區(qū)域具有多個(gè)典型的吸收峰，根據(jù)這些特征吸收我們就可以對(duì)其進(jìn)行定量和定性判別分析。該法具備無損、高效、快速、成本低、綠色環(huán)保和易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等特點(diǎn)，利用近紅外光譜分析方法測量食品特別是乳制品中的三聚氰胺含量可以克服傳統(tǒng)方法的諸多弊端，是牛奶質(zhì)量檢測的理想方式。劉景旺等使用英國PeikinElmer公司的SpectrumGX1系列傅里葉變換型紅外光譜儀，通過儀器配套的軟件Spectrum控制研究了三聚氰胺在乳制品的中紅外和近紅外吸收光譜數(shù)據(jù)，得到結(jié)論：可以通過觀測三聚氰胺在近紅外波段的特征譜線實(shí)現(xiàn)其在乳制品中的定性檢測。劉小莉等采用傅利葉變換近紅外光譜儀研究得出當(dāng)飼用魚粉中摻入三聚氰胺量在0.1%～15.0%時(shí)，6873.4～6514.7cm-1可作為定性鑒定飼用魚粉是否摻雜三聚氰胺的特征譜峰，識(shí)別率為96.5%。同時(shí)，所建立的定量分析模型，可檢測出三聚氰胺的含量，最低檢測限為0.1%。
2.8毛細(xì)管電泳法
毛細(xì)管電泳是一種無需采用有機(jī)溶劑、經(jīng)濟(jì)高效的分離分析方法，目前已廣泛應(yīng)用于多種藥物制劑、蛋白質(zhì)及食品的分析檢測中。李志偉等采用高效毛細(xì)管電泳建立奶制品中三聚氰胺的含量測定方法，以30mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH5.0)為電泳介質(zhì)，未涂層石英毛細(xì)管(75μm×78cm，有效長度70cm)為分離通道，紫外檢測波長240nm，分離電壓10kV。三聚氰胺在10.0～50.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9992，平均加標(biāo)回收率為97.04%。饒欽雄等建立了高效毛細(xì)管電泳-二極管陣列檢測器檢測雞蛋中三聚氰胺的方法。樣品用三氯乙酸提取，固相萃取小柱凈化處理后進(jìn)行檢測，以50mmol/L甲酸250mmol/L甲酸銨(pH2.5)為緩沖溶液，在總長度為58.5cm、內(nèi)徑為75μm的毛細(xì)管中，分離時(shí)間約6min，測得的定量限為0.25mg/kg。三聚氰胺濃度在0.25～5.0mg/kg范圍內(nèi)進(jìn)行添加回收實(shí)驗(yàn)，平均回收率為80.2%～90.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.7%～3.4%。
2008年三鹿等品牌的奶制品被爆出添加三聚氰胺后，消費(fèi)者對(duì)整個(gè)中國奶制品市場的質(zhì)量信任度達(dá)到最低谷。經(jīng)過近一年的時(shí)間，事件剛剛有所平息，2009年年底，上海市食品安全聯(lián)席會(huì)議辦公室發(fā)布了“上海熊貓乳品有限公司因涉嫌生產(chǎn)、銷售三聚氰胺超過國家標(biāo)準(zhǔn)的乳制品，被監(jiān)管部門依法查處”的消息，公眾再次感受到三聚氰胺的威脅。三聚氰胺的幾種檢測方法各有千秋，也基本能滿足實(shí)驗(yàn)室對(duì)三聚氰胺日常檢測的需要。不同的檢測方法具有不同的檢測極限，適用于不同的檢測領(lǐng)域。實(shí)際應(yīng)用中要根據(jù)樣品性質(zhì)及檢測要求選擇提取和測定方法。隨著分析方法和技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，相信會(huì)有更快速簡便、準(zhǔn)確度和靈敏度更高的方法出現(xiàn)，這對(duì)于食品和飼料的安全性有著十分重要的作用。
