1.1基因型對(duì)再生的影響
不同基因型的黃瓜材料,在誘導(dǎo)愈傷、不定芽和生根等方面均有顯著差異。 [2]以 85個(gè)基因型的子葉外植體為材料,在相同的誘芽培養(yǎng)基上僅有 28個(gè)基因型的外植體有不定芽發(fā)生;杜[3]發(fā)現(xiàn)在 12個(gè)黃瓜品種之間,不定芽誘導(dǎo)率最高可達(dá) 73%,最低只有 25%; [4]以東北地區(qū) 4個(gè)黃瓜主栽品種為材料,發(fā)現(xiàn)不定芽的誘導(dǎo)率顯著不同; [5]研究表明,不同基因型黃瓜的子葉節(jié)的再生芽數(shù)明顯不同。[6]進(jìn)行了黃瓜子葉誘導(dǎo)不定芽的研究,發(fā)現(xiàn) 6-BA和 ABA搭配時(shí),出芽率達(dá) 86.1%; [7]發(fā)現(xiàn), NAA誘導(dǎo)的愈傷比 2,4-D誘導(dǎo)的愈傷容易分化出芽點(diǎn),在 MS附加 BA 2.0 mg/L、NAA 0.3 mg/L和 GA3 0.25 mg/L的培養(yǎng)基中芽分化率可達(dá) 64%; [8]指出極低濃度的 NAA能誘導(dǎo)出大量愈傷組織;但也有學(xué)者持相反意見(jiàn),認(rèn)為 NAA不利于黃瓜材料 c-8的子葉再生,而 IAA能較好地促進(jìn)其再生。除此之外,也有關(guān)于其他激素能促進(jìn)再生的報(bào)道。 [9]等優(yōu)化了 TDZ和 IBA的組合濃度,發(fā)現(xiàn)在 0.005 mg/L TDZ+0.05 mg/L IBA的培養(yǎng)基中,不定芽的誘導(dǎo)率達(dá)到 93.3%; [10]認(rèn)為魯黃瓜 9號(hào)的最佳誘芽培養(yǎng)基為 MS+0.06 mg/L TDZ。
1.2激素組合對(duì)再生的影響
外源激素的種類(lèi)及濃度對(duì)黃瓜不定芽的誘導(dǎo)和生長(zhǎng)具有重要作用。基因型不同,對(duì)激素種類(lèi)和相互配比的要求也不盡相同。從相關(guān)的報(bào)道看,黃瓜組織培養(yǎng)中較常用的激素有 6-BA、NAA和 IAA,近年來(lái)也有 TDZ能快速誘導(dǎo)芽分化的文獻(xiàn)報(bào)道。
1.3外植體類(lèi)型與苗齡對(duì)再生的影響
(1)組織培養(yǎng)中外植體的種類(lèi)對(duì)不定芽的再生影響很大。在黃瓜組織培養(yǎng)中使用的外植體類(lèi)型有子葉、下胚軸、原生質(zhì)體、真葉、莖尖、葉柄、花藥、未受精的子房等。
(2)以往大多采用子葉作為誘芽外植體,近年來(lái)的研究則趨向認(rèn)為子葉節(jié)是誘導(dǎo)率最高的外植體。另外也有用真葉、莖尖等作為外植體進(jìn)行誘芽的研究。此外,人們對(duì)黃瓜原生質(zhì)體的分離和再生也進(jìn)行了研究。
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