是一類(lèi)新型農(nóng)藥,由昆蟲(chóng)激素利對(duì)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的植物性物質(zhì)制成,或?yàn)槿斯ず铣傻姆吕ハx(chóng)激素。昆蟲(chóng)激素是由昆蟲(chóng)自身分泌并影響其變態(tài)、發(fā)育、繁殖或互相傳遞信息的微量化學(xué)物質(zhì)。當(dāng)它的分泌受到抑制或增加時(shí),蟲(chóng)的發(fā)育或正;顒(dòng)即受阻礙、干擾。在多種昆蟲(chóng)激素中只有一部分可用作農(nóng)藥,其特點(diǎn)是活性高、用量少(一股在1微克以下的劑量即發(fā)生作用)、專(zhuān)一性強(qiáng)且無(wú)公害。由于這類(lèi)藥劑與傳統(tǒng)殺蟲(chóng)劑毒殺害蟲(chóng)的致死作用不同,故也稱(chēng)作“軟殺蟲(chóng)劑”或第3代殺蟲(chóng)劑。主要有米滿(mǎn)、卡死克、抑太保等,此類(lèi)農(nóng)藥見(jiàn)效相對(duì)較慢[9]
1.7 有機(jī)氯農(nóng)藥 有機(jī)氯農(nóng)藥由于在土壤中的滯留期均可長(zhǎng)達(dá)數(shù)年、氯苯結(jié)構(gòu)較為穩(wěn)定,不易為生物體內(nèi)酶系降解,所以積存在動(dòng)、植物體內(nèi)的有機(jī)氯農(nóng)藥分子消失緩慢這些特性,通過(guò)生物富集和食物鏈作用,造成農(nóng)藥公害[10]。該類(lèi)農(nóng)藥是高殘毒農(nóng)藥,其中六六六、DDT等我國(guó)早已禁用。 2 蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法 大致可分為4大類(lèi),即生物測(cè)定法、化學(xué)檢測(cè)法、免疫分析法和生化檢測(cè)法。 2.1 生物測(cè)定法 生物測(cè)定法利用特定生物對(duì)相應(yīng)農(nóng)藥化合物的特定生化反應(yīng)來(lái)判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況,無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行前處理或前處理比較簡(jiǎn)單快速,但對(duì)供試生物要求較高,測(cè)定結(jié)果不能確定農(nóng)藥品種,并且可能山現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性情況,該方法一般作為引起中毒農(nóng)產(chǎn)品現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
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2.2 免疫分析法
有放射性免疫分析、酶免疫分析、多組份分析物免疫分析、免疫傳感器分析等,最為常用的是酶聯(lián)免疫法(ELISA 法),它主要是以抗原與抗體的特異性、可逆性結(jié)合反映為基礎(chǔ)的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法,該法利用化學(xué)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的原理,先將小分子農(nóng)藥化合物與大分子生物物質(zhì)結(jié)合成大分子,做成抗原,并使之在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生抗體,對(duì)抗體篩選制成試劑盒,通過(guò)抗原與抗體之問(wèn)發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng),依靠比色米確定農(nóng)藥殘留,它具有專(zhuān)一性強(qiáng)、靈敏度高、快速、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),試劑盒可廣泛川于現(xiàn)場(chǎng)樣品和大量樣品的快速檢測(cè),可準(zhǔn)確定性、定量[11]。但由于受到農(nóng)藥種類(lèi)多,抗體制備難度大、在不能肯定樣本中存在農(nóng)約殘留種類(lèi)時(shí)檢測(cè)有一定的畝目性以及抗體依賴(lài)國(guó)外進(jìn)口等影響,酶聯(lián)免疫法的應(yīng)剛范圍受到較大的限制,目前,我國(guó)市場(chǎng)上酶聯(lián)免疫法成品試劑盒依賴(lài)從國(guó)外進(jìn)口,囚此沒(méi)有大范圍推廣使用。 2.3 化學(xué)檢測(cè)技術(shù) 用于農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測(cè)方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、同位素標(biāo)記法、核磁共振波譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等,白二十世紀(jì)九十年代以米,現(xiàn)代化學(xué)分析技術(shù)日新月異,許多新技術(shù)已進(jìn)入實(shí)刖階段,如毛細(xì)管電脈儀技術(shù)(CZE),色質(zhì)聯(lián)剛技術(shù)(GC-MS、HPLC-MS)超臨界流體色譜技術(shù)(SFC),直接光譜分析技術(shù)等[12]引。這些新技術(shù)的應(yīng)用,大大提高農(nóng)藥殘留分析的靈敏度,簡(jiǎn)化分析步驟,提高了分析效率。但是,這些分析方法有的靈敏度不高,如分光光度法、薄層層析法等。有的需要昂貴的儀器,如色質(zhì)聯(lián)用法、核磁共振波譜法等。還有的需要特殊的設(shè)備,如同位素標(biāo)記法等。因此,目前,普遍采用的還是氣相色譜法利液相色譜法,它們具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏以及穩(wěn)定性利重現(xiàn)性好,線性范圍寬、耗資低等優(yōu)點(diǎn)。 2.4 生化檢測(cè)技術(shù) 有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)約共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰兒日堿脂酶抑制物,因此可以利川農(nóng)藥靶標(biāo)酶.乙酰膽堿酯酶(ACHE)受抑制的程度來(lái)檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥。該方法目前已開(kāi)發(fā)出了相應(yīng)的各種速測(cè)卡和速測(cè)儀。該方法檢測(cè)時(shí),蔬菜中的水份、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會(huì)對(duì)農(nóng)藥殘留物的檢測(cè)造成干擾,不必進(jìn)行分離去雜,省了大量預(yù)處理時(shí)間,從而能達(dá)到快速檢測(cè)的目的,因此該法具有快速方便、前處理簡(jiǎn)單、無(wú)需儀器或儀器相對(duì)簡(jiǎn)單,適用于現(xiàn)場(chǎng)的定性和半定量測(cè)定,目前的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)就是用了該方法,已上升為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為NY/T448-2001,名稱(chēng)為蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)方法,但方法只能用于測(cè)定有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑,其靈敏度和所使用的酶、顯色反應(yīng)時(shí)間和溫度密切相關(guān),經(jīng)酶法檢測(cè)出陽(yáng)性后,需用標(biāo)準(zhǔn)儀器檢驗(yàn)方法進(jìn)一步檢測(cè),以鑒定殘留農(nóng)藥品種及準(zhǔn)確殘留量[13].酶抑制法是我國(guó)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)中研究最多、應(yīng)用最多也相對(duì)成熟的一種對(duì)部分農(nóng)藥進(jìn)行殘留快速檢測(cè)的生化檢測(cè)技術(shù)。 目前國(guó)內(nèi)外蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法主要有2個(gè)發(fā)展方向,一是利用色譜法的實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè),二是利用酶抑制法的快速定性檢測(cè)[14]。前者雖然具有檢測(cè)靈敏度高、結(jié)果相對(duì)正確等優(yōu)點(diǎn),但儀器投資大(動(dòng)輒30-40萬(wàn)元,甚至更高):檢測(cè)費(fèi)用高(每檢測(cè)一個(gè)樣品均需300-400元);檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)(樣品前處理手續(xù)復(fù)雜,耗時(shí)1~2 h,檢測(cè)時(shí)間總計(jì)需3-4 h);人員技術(shù)要求高,所以,在日常的蔬菜質(zhì)量安全監(jiān)督(現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè))中,要采用定量的檢測(cè)方法是不切實(shí)際的。后者雖然準(zhǔn)確性不及氣相色譜,但具有以下優(yōu)點(diǎn):一是投入成本小。快速檢測(cè)方法實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求相對(duì)較低;儀器購(gòu)買(mǎi)費(fèi)用不到萬(wàn)元,日常使用中每檢測(cè)1個(gè)樣品僅需1.0~1.5元;二是技術(shù)要求低?焖贆z測(cè)試驗(yàn)程序簡(jiǎn)單,技術(shù)要求不高。植保系統(tǒng)的工作人員,經(jīng)過(guò)系統(tǒng)培訓(xùn)完全可以勝任。三是檢測(cè)速度快?焖贆z測(cè)且試驗(yàn)步驟簡(jiǎn)捷,檢測(cè)一例樣品約20分鐘,特別適合在果蔬生產(chǎn)基地和蔬菜批發(fā)市場(chǎng)上市前農(nóng)藥殘留毒性的檢測(cè)使[15]。我站現(xiàn)使用PR-203-6T農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀(廈門(mén)市信儀科技有限公司生產(chǎn))對(duì)蔬菜批發(fā)市場(chǎng)蔬菜上市前農(nóng)藥殘留毒性的檢測(cè) 3 蔬菜農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀在蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)上的應(yīng)用 3.1 工作原理 在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謂十產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯示劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)在412 nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的存在。 3.2 檢驗(yàn)依據(jù)是GB/T5009.199.2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》[16]。 3.3 所用試劑 廣州綠洲生化科技有限公司出品的蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)專(zhuān)用試劑(分析純)。 試劑的配制:① pH8.0緩沖液:取一包磷酸鹽加入500ml純凈水中攪拌溶解,常溫保存。 ② 酶制劑(含乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶)。 ③ 底物:取一瓶加2.5ml純凈水溶解,4℃水箱保存。 ④ 顯色劑:取一瓶加25ml磷酸緩沖液溶解同,避光保存。 3.4 分析步驟 3.4.1 對(duì)照測(cè)試先于試管中加入2.5ml緩沖溶液,再加入0.1ml酶液、0.1ml顯色劑,搖勻后放置10min (每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致)。再加入0.02ml底物搖勻,應(yīng)立即放入儀器比色池中,按<對(duì)照>鍵進(jìn)行對(duì)照測(cè)試。 3.4.2 樣品提取選取lg有代表性的蔬菜樣品,沖洗掉表面泥土,切成 1 cm 左右見(jiàn)方碎片,放入試管中,加入5ml緩沖液,振蕩1-2min,倒出提取液即為待測(cè)樣品。每個(gè)蔬菜樣品的選取前均須將砧板和刀具洗凈、擦干,以避免交叉污染。 3.4.3 樣品溶液測(cè)試先于試管中加入2.5ml樣品提取液,再加入0.1ml酶液、0.1ml顯色劑,搖勻后放置10min (每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致)。加入O.02ml底物搖勻,立即放入儀器比色池中,按<樣品>鍵進(jìn)行測(cè)試。 3.4.4 檢驗(yàn)結(jié)果計(jì)算中國(guó)農(nóng)業(yè)人才網(wǎng)及旗下網(wǎng)站為您提供畜牧人才、種植人才、農(nóng)資人才、食品人才等求職招聘服務(wù)