3 飼料病原菌污染的控制措施和檢測技術(shù)研究進(jìn)展
　　KelleyTR等嘗試了用單螺桿干法膨化工藝來減少由食品廢物制成的飼料中的病原菌。他們對食品廢物進(jìn)行回收收集，漿化，與玉米粉和豆皮以40:5:5的比例使用臥式螺帶混合機進(jìn)行混合，使用InstaPro公司的600JR型單螺桿膨化機(9.53cm蒸汽閘×4，0.79cm直徑壓模)，在110～135°C下干燥膨化30s左右。

 對飼料原料、膨化前飼料和膨化后飼料分別進(jìn)行傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)方法鑒別大腸菌群、腸球菌、葡萄球菌、異養(yǎng)和非特異性厭氧或兼性厭氧細(xì)菌等病原菌。結(jié)果顯示，膨化后飼料樣品中的一些異養(yǎng)和非特異性厭氧和兼性厭氧菌仍然會有殘留，這說明在這項研究中使用的膨化技術(shù)并不能保證對飼料一貫的滅菌效果。但是膨化后的飼料樣品中的病原菌濃度較之前有大幅度降低，因此認(rèn)為單螺桿干式膨化工藝可明顯降低飼料中致病細(xì)菌的濃度。
　　OkeloPO等則更進(jìn)一步，優(yōu)化了Sabetha公司的E325單軸膨化機對于嗜熱脂肪芽孢桿菌和鼠傷寒沙門氏菌的殺滅條件。他們將兩種病菌分別接種到實驗飼料(600g玉米粉/kg，300g豆粕/kg，100g動物蛋白/kg組成)中，然后以膨化機出口溫度(T)，飼料水分含量(Mc)，膨化時間(Rt)為三個影響因素，以病菌殺滅數(shù)為因變量進(jìn)行旋轉(zhuǎn)響應(yīng)面設(shè)計以獲得對兩種病菌殺滅的最優(yōu)膨化條件。結(jié)果顯示，對沙門氏菌的最優(yōu)殺滅條件為T=83°C，Mc=285g/kg，Rt=7s，而對嗜熱芽孢桿菌芽孢的最優(yōu)殺滅條件為T=110°C，Mc=245g/kg，Rt=11s。SauliI等以瑞士肥育豬飼料的沙門氏菌為指標(biāo)，研究了不同生產(chǎn)工藝對其影響。研究將豆粕和谷物這兩種主要原料作為沙門氏菌的兩個來源。將實驗分為四個組：(1)混合后的配合飼料直接制粒(對照組)。(2)混合后的配合飼料進(jìn)行熱處理。(3)混合后的配合飼料添加有機酸處理。(4)混合后的配合飼料進(jìn)行有機酸加熱處理。同時將整個流程分為原料運輸、貯藏、配料稱重、混合、制粒、成品儲存六個步驟。為了得到更準(zhǔn)確的工藝對沙門氏菌的影響結(jié)果，此研究對兩種原料生產(chǎn)前的污染水平進(jìn)行了測定，同時考慮了兩種原料在貯藏，配料稱重，混合三個步驟中沙門氏菌的交叉污染情況。實驗采用Oxoid公司沙門氏菌快速檢測試劑，結(jié)果表明，通過生產(chǎn)途徑的改變，一批肥育豬飼料成品含有沙門氏菌的污染率從34%(對照組)下降到了0(添加了有機酸和熱處理步驟)。不采取生產(chǎn)工藝措施的時候污染沙門氏菌的污染率和沙門氏菌的可能性是最高的。
　　Doyle MP綜述了將飼料和有機酸與抗菌素微膠囊化來阻止病原菌傳播只取得了不大的進(jìn)展，但這種方法用于其它抗菌添加劑可能會有更大的潛力。同時綜述了對農(nóng)場動物的噬菌體療法，其能夠顯著地減少動物中病菌傳播，但是卻要依靠于其很有效作用時間很短的性質(zhì)以及噬菌體抗體亞種群的進(jìn)一步發(fā)展。這兩種方法被認(rèn)為可以有效降低農(nóng)場動物沙門氏菌的感染從而降低飼料鏈中沙門氏菌的污染率。
　　Koyuncu S等將DNA微陣列技術(shù)應(yīng)用于飼料鏈中沙門氏菌的檢測并與傳統(tǒng)的考夫曼血清分型方法進(jìn)行了對比。這種技術(shù)利用分子雜交的原理，將許多特定基因片段作為探針，有規(guī)律地排列固定于支持物上，然后與待標(biāo)記的樣品基因的按堿基對原理進(jìn)行雜交，隨后檢測雜交信號強度的強弱，并配以計算機系統(tǒng)對每一探針上的熒光信號作出比較檢測，從而達(dá)到目的基因的檢出。該研究先對飼料樣品中的一般菌種進(jìn)行微生物培養(yǎng)(BPW)，再找出沙門氏菌疑似菌株進(jìn)行富集培養(yǎng)(MSRV)，然后分別使用考夫曼血清分型法和DNA微陣列法檢測飼料中沙門氏菌。結(jié)果表明，微陣列技術(shù)能夠正確識別81%的沙門氏菌陽性樣本，檢測特異性達(dá)到100%。而嘗試不經(jīng)過富集培養(yǎng)，直接從一般微生物培養(yǎng)中挑取菌株分離DNA來進(jìn)行微陣列檢測則出現(xiàn)了大量的假沙門氏菌陰性樣本，因此認(rèn)為對試驗方法的這種優(yōu)化是不合適的。
Tajkarimi M等在實驗室環(huán)境下使用無水氨氣對小麥秸稈、青貯玉米、玉米粒和棉籽四種飼料原料進(jìn)行殺菌處理，以期獲得氨氣對飼料的殺菌效果。先將實驗室條件下培養(yǎng)的目標(biāo)大腸桿菌屬和沙門氏菌屬細(xì)菌引入上述四種原料的無菌水懸浮液中，再將樣品在25°C干燥24h。之后把樣品放在壓力真空室中用87.5%純度的無水氨氣在0.5個大氣壓下處理3次，在1個大氣壓下處理1次，保存24h之后進(jìn)行無菌取樣檢測并與之前引入的病菌水平進(jìn)行對比。結(jié)果顯示，氨氣處理能夠有效地殺滅玉米粒、麥秸、棉籽中的病菌(各個菌種的殺滅數(shù)均>5log10cfu/g)，而青貯玉米自身就具有比較強的抗菌活性，因此認(rèn)為氨氣對青貯飼料的殺菌效果并不顯著。

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